在生物化学测定中,种子活细胞里发生的还原过程是通过一种指示剂的还原作用而显现出来的。所用的指示剂是一种可被种子组织吸收的四唑盐类的无色溶液。它在种子组织里参与活细胞的还原过程,从脱氢酶接受氢离子,使氯化(或溴化)三苯基四氮唑经过氢化作用,在活细胞里产生红色、稳定、不扩散的三苯基甲腊(Triphenyl Formazam),参看下面的反应式。
这样就可根据四唑染成的颜色和部位,区分种子红色的有生活力部分和无色的死亡部分。除完全染色的有生活力种子和完全不染色的无生活力种子外,还可能出现一些部分染色的异常颜色或不染色的坏死组织。当然,种子有无生活力主要取决于胚和(或)胚乳(或配子体)坏死组织的部位和面积的大小,而不一定在于颜色的深浅。颜色的差异主要功能是将健全的、衰弱的和死亡的组织判别出来,并确定其染色部位,才有决定意义。
根据以上理由和所用指示剂,把这种测定称为“局部解剖图形的四唑测定”(Topographicaltetrazolium test)。这就是说,可根据种子胚和活营养组织局部解剖染色部位及颜色状况,鉴定种子胚的死亡部分,查明种子死亡的原因。如玉米和小麦种子盾片中部不染色,表明种子是受到热损伤引起的。同样,如种子胚根不染色,表明种子衰老,首先从胚根死亡开始或受热或化学损伤。
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