1.样品稀释:称取土样10g,加入到备好的玻璃珠和无菌水(90ml)的三角瓶内,振摇5 min。按微生物稀释法操作,稀释到稀释到10-3~10-5稀释度。2.加热处理:取最后三支土样稀释液,置于100℃水浴中3~5分钟后,灭活营养细胞,保留芽孢。3.涂布平板和培养:培养基倒平板,凝固后,处理好的三个稀释度的样品各取0.1ml涂布平板, 30℃倒置培养24h以上。4.形态观察进行单染色或者芽孢染色方法,观察分离出的细菌的芽孢产生情况。
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