根据流行病学资料、临床症状及病理变化各方面综合诊断。如有典型胸腔病变，则结合流行病学资料及临床症状常可做出初步诊断。确诊有赖于血清学检查和细菌学检查。本病常用的血清学检查方法为补体结合试验。也可应用凝集反应试验，此法操作较简便，但因凝集素在病牛体内持续时间短，故其准确性不如补体结合试验。在本病疫区，也有应用间接血凝.
试验、玻片凝集试验作为辅助诊断之用者。细菌学检查时，取肺组织、胸腔渗出液及淋巴结等接种于10％马血清马丁肉汤及马丁琼脂，37℃培养2～7d，如有生长，即可进行支原体的鉴定。
本病应与牛巴氏杆菌病、牛肺结核病等进行区别诊断。