如何进行菌种贮藏？

1.低温定期移植贮藏法 将需要贮藏的菌种接种在适宜的斜面培养基上，适温培养，当菌丝健壮地长满斜面时取出，放在3℃-5℃低温

干燥处或4℃冰箱、冰柜中贮藏，每隔4-6个月时间移植转管一次，具体应根据菌种特性决定。

2.液体石蜡贮藏法 取化学纯液体石蜡(要求不含水分、不霉变)装于三角瓶中加棉塞并包纸，在1公斤/平方厘米压力下灭菌1小时，将处

理好的石蜡油移接在空白斜面上，在28℃-30℃温度下培养2-3天，确定无杂菌生长方可使用。然后用无菌操作的方法把液体石蜡注入待贮

藏的斜面试管中。

3.沙土管贮藏法 取河沙用水浸泡洗涤数次，过60目筛除去粗粒，再用10%盐酸浸泡2-4小时，除去其中有机物质，再用水冲洗至pH

值达到中性，烘干备用。

4.滤纸片贮藏法 取白色(收集深色孢子)或黑色(收集白色孢子)滤纸，剪成4厘米0.8厘米的小纸条，平铺在培养皿中用纸包裹进行灭菌

(1公斤/平方厘米，30分钟)。采用钩悬法收集孢子，让孢子落在滤纸条上。将载有孢子的滤纸条放入贮藏试管中，再将贮藏试管放入干燥

器中1-2天，除去滤纸水分，使滤纸水分含量达2%左右，然后低温贮藏。

5.自然基质贮藏法 ①麦粒贮藏法。取无瘪粒、无杂质的小麦淘洗干净，浸泡12-15小时，加水煮沸15分钟，继续热浸15分钟，使麦

粒胀而不破，沥干水分摊开晾晒，使麦粒的含水量在25%左右。

②麸曲保藏法。取新鲜麸皮，过60目筛除去粗粒。将麸皮和自来水按1：1拌匀，装入小试管，每管约装1/3高度，加棉塞用纸包扎，

高压灭菌(1.5公斤/平方厘米，30分钟)，经无菌检查合格后备用，将生长在斜面培养基上的健壮菌种，移种至无菌麸曲管中，移种时注意

尽量捣匀小试管中的麸皮，使其呈疏松状态，在适温下培养至菌丝长满麸皮为止，将麸曲小管置干燥器中，在低温或适温下贮藏。

6.生理盐水贮藏法 取纯氯化钠0.7-0.9克，放入100%毫升蒸馏水中，搅拌均匀分装试管，每管5-10毫升，进行灭菌(1公斤/平方厘米，

30分钟)，经无菌检查合格后备用，将待保藏的菌种接入马铃薯葡萄糖液体培养基中，适温振荡培养5-7天。

7.冷冻真空干燥法 将已培养、生长丰富的菌体或孢子悬浮于灭菌的血清、卵白、脱脂奶制成的菌悬液上，将悬液以无菌操作分装于灭

菌的玻璃安瓿中，每管0.3-0.5毫升，然后用耐压橡皮管与冷冻干燥装置连接，安瓿放在冷冻槽中于-30℃～-40℃迅速冷冻，然后在冷冻状

态下抽空干燥，并在真空状态下熔封安瓿，在-20℃低温下保存，一般可保存10年以上，但成本较高。

8.液氮超低温保藏法 首先将要保藏的菌种制成菌悬液备用，其次准备安瓿瓶，每瓶加入0.8毫升冷冻保护剂10%(体积比)甘油蒸馏水溶

液，塞棉塞灭菌(1公斤/平方厘米，5分钟)。