试管苗繁殖的一般程序？

试管面繁殖的一般程序？

试管苗繁殖大体可以分为3个阶段，即初代培养（启动培养），继代培养（增殖培养）和生根培养。
（一）初代培养
初代培养是整个培养过程的基础，其目的就是建立无菌的离体培养体系。首先要采集适宜的外植体，配制恰当的培养基。另一重要的步骤就是外植体的消毒，因为外植体的彻底消毒是减少污染的有效途径。根据不同外植体材料，选择适宜的杀菌剂和掌握准确的表面杀菌时间至关重要，外植体消毒时间过长，易引起材料的老化和褐变，甚至杀死幼嫩的外植体，过短则易引起污染。这一阶段的效果依植物种类及培养基的成分而异，可能形成一个或多个芽，也可能形成带根的植株或形成愈伤组织然后再分化芽。此阶段培养温度依植物种类不同而不同，可放于20～28℃的温度条件下培养，光照12～16h。
（二）增殖培养（继代培养）
增殖培养也叫继代培养，是实现植物快速繁殖的重要环节。这一阶段的培养目的是在较短的时间内繁殖大量有效的芽和苗。初代培养的结果，往往可以得到不定芽、再生芽、原球茎或胚状体等，但数量非常有限，还要进行增殖培养。增殖培养时选用的培养基可以和初代培养的一样，也可以略加调整，调整与否取决于增殖率，如果增殖率高，细胞分裂素的浓度可不作调整，加入适量的生长素类激素，以促进生根和防止玻璃化苗的大量发生。如果增殖率低，要调整细胞分裂素的用量，常常是提高细胞分裂素的含量。继代培养周期由分化和生长速度而定，当不定芽长满瓶时，或者培养基的养分消耗快尽时，要及时继代培养，继代周期一般为4-6周。继代培养的次数和规模要根据生产计划来确定。
（三）生根培养
这一阶段的目的是使第一阶段和第二阶段的无根苗长出不定根，并使苗继续生长。一般将增殖培养基中的芽剪成1～2㎝长的茎段，并转入生根培养基中，进行根的诱导。生根培养基一般只加生长素，不加细胞分裂素。生长素种类和浓度因植物而异。一般情况下，减少培养基中的矿质元素，常常有利于生根。因此多采用1／2或者1／4（指大量元素浓度）的MS培养基，加适量的生长素，作为生根培养基。有些植物生根需要弱光或黑暗条件。活性炭可以起到遮光的作用。同时还可以吸附一些抑制生长的物质，因此，在一些植物的组织培养时常常加入活性炭，用量0.5%左右。只有满足生根所需的激素和培养条件，才能提高生根率和增加根的数量，进而提高成活率