育苗组织培养育苗,简称“组培”,是近年来在苗木生产中出现的一种科学的新型培育苗木的技术。它是利用植物器官组织具有再生能力及具有遗传的全能性原理,在一定条件下,促进细胞组织 分化,产生新的个体,再经过一定的培养过程,使之成为一个独 立的植株。组织培养具有繁殖快、遗传性均一和苗木无毒的优 点,可以使育苗生产走向工厂化和集约化,不受季节限制,可以 在短期内大量繁殖某种植物,对发展北五味子的苗木生产具有重 大意义。
(1)仪器准备组织培养育苗的主要仪器设备有以下3类:①大型仪器高压灭菌锅、分析天平、干燥箱、超净工作 台、蒸馏水发生器和冰箱。②常用仪器器械三角瓶、移液管、量筒、试剂瓶、药用天 平、酒精灯、镊子、培养皿、烧杯和解剖刀等。③培养架高1。8m、长1。
5m、宽0。5m,每层间距0。4m。 每层用玻璃板隔开,每层上可安装2支40W的日光灯管,做辅助 光照。(2)组培接种材料的选择与消毒北五味子组培育苗,应选择幼嫩的芽苞、嫩叶或者嫩茎做接 种材料最适宜。接种前,应对接种室用甲醛熏蒸和紫外线照射分别进行灭菌 消毒,并把各种接种用具小剪、小刀和镊子等插入70%的乙醇中 进行消毒。
。选取当年的嫩茎或嫩叶做接种材料,先用净水洗去泥沙,然 后放在0。 l%HgCI2(氯化汞)溶液中消毒5分钟,再用无菌水 冲洗2遍。在无菌条件下,把嫩茎切成lcm长的切段,把叶片切 成面积约为lcm2的小片,然后把切好的接种材料茎段和小片, 分别放到诱导培养基上。
(3)诱导、产生愈伤组织植物组织培养的培养基配方有很 多种类,如MS、B5、SH和GS等几十种,现将进行北五味子组 培苗最常用的MS培养基简单介绍如下:将接种材料放到诱导培养基上,诱导愈伤组织形成。诱导培养塞是以MS培养基为基本培养基,附加0。
5mg/L的2。4 —D、 萘乙酸0。8mg/L、激素(KT) 0。5mg/L,蔗糖为2%。培养基用 琼脂固化,pH值调到5。 8左右。接种后把接种材料置于26°C的 培养室内培养。在诱导愈伤组织期间,不进彳f光照。经过半个月的培养,可以见到接种材料上有愈伤组织形成, 叶片或茎段在切口附近有乳白色的愈伤组织发生。
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