(1)打空装袋:新鲜原木截成30厘米长的短椴木,用刮刀修光断面周围残留的针刺状物,以免刺破袋膜,然后用电转或台转打3个直径1。8厘米,深3厘米的孔穴,修光穴空装入折径20-30厘米,后0。005厘米的低压聚乙烯袋内,孔穴朝袋壁,每袋2-4段,松紧适中,收拢袋口用绳扎紧,直径过粗的椴木劈成两半,打空装袋。椴木偏干时采用浸水或袋内加水方法增加含水量。
(2)灭菌:叠放后用蒸汽炉通入蒸汽灭菌,菌袋叠放时。每二三层需留出空隙或采用一层横排一层竖排即“井”字形叠放。
当温度达到100度后保持10小时不中断,中途若需要加水,最好备好开水。整个过程做到开始大火使温度很快上升至100度,最后1-2小时用旺火攻尾,使之彻底。灭菌结束,闷3-5小时,等灶内温度降至70度以下,才逐渐开灶门,取出放入冷却室内用消毒药物熏蒸冷却。搬移,叠放菌袋时采用合适的塑料筐,做到轻拿清放,切记袋膜破坏。若用高压灭菌装袋时用聚丙烯袋分装,0。137兆帕压力保持1。5-2小时,自然降落。
(3)接种:将冷却后的料袋放入接种箱或接种室,接种罩内,再次用杀菌剂熏蒸或氧原子环境消毒器消毒灭菌。然后双人操作,一人用45瓦电烙铁在椴木孔穴位置烫破袋膜,另1人用长镊子夹取成块菌种填入孔穴内,在转交给烫空人封贴专用胶布。若栽培种用塑料袋扩制培养,接种时可戴上无菌指套从袋底切口直接掰取菌块填入孔穴内,这样速度快,平实,效果好。菌块要求新鲜,菌龄25天以内。
(4)发菌管理:发菌室事先经过严格消毒,杀虫后,将菌袋摆放在层架上,或纵横分层堆叠在具垫板或泡沫塑料板的地面上,控温25度左右,使菌丝很快定植,蔓延。菌丝在椴木中生长速度以轴向最快,横向次之,切向最慢,三者长速比大致为4:1:0。5。
因此,接种后应在适温下培养,促进菌丝很快从轴向横向长满整个椴木表面以及向韧皮部,形成层,维管束等延伸。室内保持空气新鲜,每天中午开窗,通风换气,空气相对湿度控制在70%以下,每周微喷3%来苏水1次,以防杂菌滋生。
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