种子电泳测定应注意的事项？

1药液配制

凝胶溶液取1摊丙烯酞胺、109尿素、0.29甲叉双丙烯酞胺，置于烧杯中，加蒸馏水溶解，转人容量瓶中，然后再加3而冰醋酸、0.029硫酸亚铁，定容至rooml。冬季低温时，要对结冰的冰醋酸适当加热溶解。染色液取0.49考马斯亮蓝，加25nil无水乙醇溶解，再加50一609三氯乙酸，加蒸馏水定容至sooml。

2样品提取

从送验样品中随机分取所需数量(loo一200粒)的玉米种子样品，经单粒粉碎后，装人小离心管中，加人样品提取液(一般按固体体积的1:1加人)，充分摇匀，30mi。后用离心机(4以刃印m)离心4min后备用。

3制凝胶板

3.1装橡胶框 将预先洗净的玻璃板用滤纸擦干后装人橡胶框中，然后把橡胶框固定在垂直板电泳槽内，短玻璃板向里(正极)，拧紧螺丝，备用。

3.2封底 缝取适量(IOml左右)凝胶溶液置于烧杯中，加一滴催化剂，迅速摇匀，并从长玻璃板外测沿玻璃板迅速倒人，等待凝胶聚合好即可。

3.3灌胶 用凝胶液封好底缝后，取适量(约30ml)凝胶溶液置于烧杯中，用滴管加人1一2滴催化剂溶液，迅速灌人槽中。本步灌胶是整个操作能否成功的关键。

4上样电泳

4.1点样利用点样枪将样品加人样品槽中时，取样量要适当，各槽加样量要一致(根据样品槽的大小一般30一40己)。若太多，会造成谱带不清楚;太少，可能丢失某些谱带。每点一个样品要用水清洗进样器，防止交叉污染。

4.2电泳

将电泳槽中注人电极液后，中间接正极，左右接负极，接通电源，控制电流85mA左右。然后调节电压旋钮逐渐旋至维持所需电流的最低点。随着电泳时间的延长，电流会逐渐降低，那时再逐渐加大电压。工作中发现如果一开始将电压旋钮旋至较大，在电泳过程中容易产生过多的热量，导致谱带拖尾、变形等现象，电泳很容易失败。

5 试验中的安全措施

一些药品具有毒性或腐蚀性，实验室应保持通风透气，操作中要防止药液溅到皮肤或衣服上。