1 冻精保存和解冻技术1.1 冻精保存冻精购入后及时检查活力,最好只取山一小罐冻精装入提桶内使用,其它冻精装入纱布袋内沉入液氮罐底部,观察液氮情况,及时添加,定期检查活力,确保活力在0.3以上。
1.2 解冻技术解冻时用长柄镊子迅速取出一支细管投入测好温度的水中,轻摇15s左右取出擦干,若要立即输精时用38,-40℃水温解冻,精于活力较好,若远距离输精时用35~37℃水温解冻,此时精子存活时间较长,解冻好的细管装入试管藏于贴身处以保持温度恒定,在2h内完成输精。
2 母牛保定技术2.1 徒手保定法先试探牛脾性,易接近时用手牵住笼头,或一侧靠与墙面,术者可直接操作。
2.2 前后肢保定法将牛前肢或后肢用细绳“∞”型吲定,避免太紧,使牛自然站立即可操作。若还不安定时找一块旧布或衣物将双眼蒙住,.并牵遛几步离开牛熟悉的环境,此时牛均可保持安定。
3 发情鉴定技术首先向畜主询问母牛发情情况,有无哞叫、爬跨行为,开始发情时间,了解年龄、胎次、以往发情情况等。然后观察外表症状及直肠触摸卵泡判断发情状况,确定输精时间。
3.1 外表观察法可从性欲、性兴奋、外阴部变化米观察。初期母牛出现爬跨行为、不安、食欲减退、产奶量下降,阴唇微肿,阴道黏膜充血璺粉红色,流出少量清亮粘性弱的透明黏液。盛期哞叫,常作排尿姿势,爬跨或接受爬跨,r阴门排出多量透明呈玻璃状特眭强的黏液,阴唇肿胀明显,黏膜充血。
3.2 直肠触摸卵巢检查法是发情鉴定最可靠的方法,只有不断实践,才能提高检查水平。
3.2.1 卵泡发育的判断 发情初期一侧卵巢稍增大,质地稍硬无弹性,波动不清,人约持续9~l l h,不宜输精。盛期卵巢体积增大1倍,卵泡明显呈小球状,触诊能感觉波动和弹性,约延续8~12 h,不宜输精。后期卵泡明显突出于卵巢表面,泡壁变薄,表面紧张有弹性,似熟透了的葡萄,持续4~10 h,宜于输精。
3.2.2 卵泡发育的类型 卵泡发育可分为全泡、半泡、小泡和隐泡四种类型。全泡(大泡):卵泡体积大于卵巢,可增大到原卵巢的2^3倍,似葡萄状,不紧张,波动明显。半泡:卵巢体积和卵泡体积大略相同,发育由硬变软,弹性强,有波动,易排卵。
小泡:卵泡体积小于卵巢,排卵前不再增大,触感卵巢上有一软化点,发育由硬变软,壁薄紧张,但少波动。隐泡(中心泡):卵巢增大明显,质地均匀似软肉状,持续期长,排卵后卵泡处出现空隙,触摸有软的两层皮感觉。
4 适时输精适时输精是提高受胎率的关键措施,母牛发情表现差异较大。因此只有熟练掌握触摸卵巢变化,作好发情鉴定,才能提高受胎率。
4.1 对青年母牛及膘情良好牛的配种此种牛发情症状明显,排卵较快。输精两次者宜在发情开始后8~12 h左右输精一次,间隔8~12 h发情末期再输精一次。输精一次者可在外观发情停止,阴道黏液呈灰白色或带粘稠状,触摸卵巢卵泡成熟波动明显时输精。
4.2 对老龄及膘情不良牛的配种有些老龄牛和膘情差的牛其发情持续期较长,排卵较慢,同时假发情也较多。因此必须认真做好直检工作后再确定输精时间,一般比正常母牛推后6~12 h,甚至更长时间。也可适当注射药物,以提高受胎率,发情初期注射三合激素或雌二醇1~2ml,末期输精后注射黄体酮l0~20 ml,也可第一次配种后肌注促排二号l~2支,间隔8~12 h再输第二次。
5 输精技术做好器械的消毒工作,用高锰酸钾清洗外阴及肛门周围,擦干。输精要求‘轻、揉、稳、准'’术者一手入直肠后抓住子宫颈,并用拇指配合将输精器导入子宫颈口}^4,通过三道环,前无阻力时即可输精。
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