白雪菇母种培养基配制方法？

1. 器具 试管 刀 天平 铝锅 棉塞 纱布 漏斗 烧杯 量筒 2. 常用的母种培养基配方 ①马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA） ：马铃薯（去皮）200g，葡萄 糖 20g。琼脂 20g，水 1000ml，{如果需要配制 250ml 的培养 基，那么马铃薯、葡萄糖、琼脂的比例是 50:5:5}，也可用蔗糖 取代葡萄糖，即为 PSA 培养基。还可以添加磷酸二氢钾 3g，硫 酸镁 1.5g，维生素 B1 10 ㎎，即为马铃薯综合培养基。广泛适 用于各种食用菌母种的分离，培养和保藏。 ②马铃薯玉米粉培养基：马铃薯（去皮）200g，蔗糖 20g，玉米 粉 50g，琼脂 20g，磷酸二氢钾 1g，硫酸镁 0.5g，水 1000ml。 本配方适合于香菇、黑木耳、猴头菌的培养。 ③马铃薯黄豆粉培养基：马铃薯 200g，蔗糖 20g，琼脂 20g，黄 豆粉 20g， 碳酸钙 10g， 磷酸二氢钾 1g， 硫酸镁 0.5g， 1000ml。 水 适用于蘑菇、草菇。 ④葡萄糖蛋白胨琼脂培养基： 葡萄糖 20g， 蛋白胨 20g， 琼脂 20g， 水 1000ml。 ⑤蛋白胨、酵母、葡萄糖琼脂培养基：蛋白胨 2g，酵母膏 2g， 硫酸镁 0.5g，磷酸二氢钾 0.5g，磷酸氢二钾 1g，葡萄糖 20g， 维生素 B1 20 ㎎，琼脂 20g，水 1000ml。 具体步骤 1. 计算。按照选定的培养基配方，计算各种成分的用量。 2. 称量。用天平秤取各种物质，马铃薯去皮去芽眼，削掉青绿部分， 对不易称量的成分，可用玻棒和烧杯称重，微量元素等需要量少， 难以称准时，可先配成较浓的原液，再从中取出需要的量。 3. 配制。若配制合成培养基，先量取蒸馏水，加入琼脂，加热溶化； 再加入称好的其他物质。为避免发生沉淀造成营养损失，加入的顺 序一般是先加缓冲剂， 再依次加入主要元素、 微量元素和维生素等； 若各种成分均不发生沉淀，也可一起加入。 4. 煮汁，去滤液。马铃薯切成 1 ㎝见方的小块或 2~3 ㎜厚的薄片，加 水约 1200ml 煮沸，再用文火保持 20~30 分钟、并适当搅拌，使营 养物质充分溶解出来，然后用 4 层预湿的纱布过滤，取其滤液。 5. 补足水量，加药品溶化。补足水量至 1000ml，然后往滤液中加入琼 脂，小火加热，搅拌至琼脂完全溶解，再加入葡萄糖和其他营养物 质使其溶化后，用 PH 试纸检测其 PH 值，可根据需要使用氢氧化 钠和盐酸，调整适宜的酸碱度，进行分装。注意开锅搅拌，防止溢 出或焦底。 6. 分装试管。制备好的培养基应趁热分装，可用玻璃试管，首先把较 大的玻璃漏斗固定在滴定架上，下接一段乳胶管和玻璃管，用弹簧 夹夹住胶管。手拿试管，分装量掌握在试管长度的四分之一。注意 分装时，培养基不能粘在试管口壁上，否则会污染棉塞。 7. 赛棉塞。注意要松紧适度 8.高压锅灭菌 30 分钟