猪喘气病（猪肺炎支原体）诊断要点有哪些？

答：猪喘气病的诊断要点：

根据流行病学、临床症状和病理变化可初步诊断。猪的其它呼吸道疾病引起的肺炎症状和病变与猪支原体肺炎有相似之处，因此对支原体肺炎的确诊必须进行实验室诊断。

1 、猪肺炎支原体的分离鉴定

猪肺炎支原体的培养成本高，耗时长，培养物滴度低，其生长极为苛刻，是最难分离和鉴定的支原体之一，生长缓慢，经常因鼻支原体过度生长而被掩盖。目前只有少数实验室具有分离猪肺炎支原体的能力。在多数情况下猪肺炎支原体的分离培养诊断法仍不可行。

2、 血清学诊断方法

猪支原体肺炎的血清学诊断主要有间接血凝试验(IHA)、补体结合试验(CF)和酶联免疫吸附试验(ELISA)三种方法，血清学阳性，结合流行病学和临床症状，便可初步诊断。IHA的特异性和敏感性较高，但不易操作。ELISA检测血清抗体，敏感性高，能进行定量分析，Bereiter等1990[10]报道，经改进的吐温-20ELISA能降低其它支原体的交叉反应。Wallgren等(1996)[11]在ELISA的比较试验中发现用间接的吐温-20ELISA检测结果出现早，且与其它支原体出现交叉反应少。猪感染肺炎支原体后在第三周产生ELISA抗体，第5-7周吐温-20ELISA光密度值达到高峰，并持续一年之久。Zimmermannd (1990) [12]报道，测定初乳是监测感染的可行方法。1994年Morris[13]报道哺乳仔猪可从母猪获得猪肺炎支原体ELISA的母源抗体，平均半衰期为15.8日龄。

为了减少血清学试验中猪肺炎支原体与其它支原体的交叉反应，不少学者将单克隆抗体技术应用于肺炎支原体的诊断。孟书霞、焦新安【14】通过制备抗猪支原体共同抗原单克隆抗体，来分析和检测猪肺炎支原体、疫苗质量、细胞培养中支原体的污染以及血清学诊断，已经取得成功。

3、PCR方法

Artiushin等(1996)[15[根据16srRNA序列设计PCR引物，扩增出人工感染猪气管分泌液和肺病灶中的猪肺炎支原体。Blanchard等(1996)[16]将PCR的敏感极限提高到500fg的提纯猪肺炎支原体DNA。Sorensen等(1997)[17]报道在猪发生肺炎的急性期，用PCR检测 猪肺炎支原体具有高度的敏感性，优于分离培养、免疫荧光检测和ELISA方法。Stemke(1997)[18]发展了套式PCR技术，敏感性提高到可检出一个猪肺炎支原体DNA。用套式PCR检测气管洗液中猪肺炎支原体比封闭ELISA和免疫荧光技术更敏感，用于猪场肺炎支原体感染的监测更适用。